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如何保證血清活性?解凍和儲存方法很重要!

更新時間:2021-10-22  |  點擊率:979

剛到貨的血清應(yīng)該怎樣儲存?

血清到底要怎樣解凍才能保證活性?

血清在4℃冰箱能放多久?

作為一名細胞培養(yǎng)大戶,你是不是經(jīng)常會糾結(jié)上面這些問題?畢竟血清這種金貴的東西,可得好好珍惜,一個不小心,就可能導(dǎo)致實驗失敗,免不了要被導(dǎo)師責備。

那這些問題到底應(yīng)該怎樣解決?有沒有標準答案?身為一個資深的代理商,關(guān)于血清的儲存和解凍問題我們可是有好好研究過的。

如果你也存在同樣的疑惑,那就請接著往下看吧。


常規(guī)儲存

首先,剛到貨的血清,趁著它還凍手,趕緊放進-20℃冰箱中,避免反復(fù)凍融。當然,如果你的課題組不差錢,-80℃冰箱空間充足,把血清儲存進去也是沒有問題的。


如何解凍

很多同學會說,不就是解凍血清嘛,這題我會!

放4℃過夜

emmm……怎么說呢,直接在4℃冰箱里過夜融化的方法,雖然很多人在這么用,但還是有一些潛在的風險的。

我們都知道,在血清這種混合物中,融化速度:蛋白質(zhì)等干物質(zhì)>水這類溶劑,所以蛋白質(zhì)會*溶解析出,而水還是結(jié)成冰的狀態(tài),導(dǎo)致瓶子中間會出現(xiàn)一根透明的冰柱,而周圍則會呈現(xiàn)上黃下紅的分層渾濁液的狀態(tài),在使用過程中很容易引起沉淀、混合不均勻、局部濃度過高等問題,影響細胞生長。

更重要的一點是,血清中珍貴的生長因子等活性物質(zhì),它們在解凍過程中,有著與細胞復(fù)蘇類似的經(jīng)歷,都需要快速解凍才能較大程度地保留生物活性。顯然,4℃過夜這樣的長時間處理,很有可能會導(dǎo)致一部分「營養(yǎng)成分」的損失,影響細胞生長。




所以,為了更好地保留血清中的活性成分,使細胞培養(yǎng)更穩(wěn)定,我們推薦使用三步法溶解,具體方法見下表,有需要的同學可以截圖保存。

如果是儲存在-80℃的血清,則需提前幾天先轉(zhuǎn)移至-20℃冰箱中(至少24小時),再使用三步法溶解,避免溫差過大使血清失活。


注:此方法國際通用,適用于所有培養(yǎng)基,在水浴過程中,血清的平面要*浸在水中。在融化過程中要慢慢搖動瓶身,使血清混勻,但搖動中盡量不要產(chǎn)生泡沫!

*解凍血清后,可以根據(jù)實驗需求,將其分裝,保證每一份夠一次使用量即可,比如:25ml/管、50ml/管等。密封好后趕緊放回-20℃冰箱繼續(xù)儲存。需要配制培養(yǎng)基的時候,再從-20℃冰箱中取出一管來解凍使用(最好能全部配成培養(yǎng)基,不要有剩余),可以有效避免反復(fù)凍融的問題(遵循現(xiàn)用現(xiàn)配、現(xiàn)配現(xiàn)解凍的原則)。配好的培養(yǎng)基可以放到4℃冰箱進行儲存。


4℃存放時間

看到這里,問題又來了,配好的培養(yǎng)基,或者剩下的那一點點血清,能在4℃冰箱里放多久呢?

先給出我們認為比較合理的答案,再來解釋原因:

7

一般情況下,已經(jīng)解凍的血清,無論是配成*培養(yǎng)基還是在冰箱里備用,都不要超過一周(7天),原因也很簡單,存放太久,生長因子等物質(zhì)容易失活,而且比較容易受到污染,影響實驗結(jié)果。

不知道今天這期內(nèi)容有沒有解決大家的疑惑,無論是國產(chǎn)還是進口血清,都不算便宜,這么貴巴巴的試劑,還請小心使用,讓它們的功效倍增,可不能讓銀子白花!



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