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一種單增李斯特菌的分離方法

更新時間:2018-09-18  |  點(diǎn)擊率:1197

涉及食品安全的一個主要因素是由致病性微生物引起的食源性疾病。在各地發(fā)生的一系列食源性疾病中,單核細(xì)胞增生性李斯特菌占著主要的地位。單核細(xì)胞增生性李斯特菌簡稱為單增李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM),是李斯特菌屬(Listeria)中能引起人畜共患病的食源性病原菌,是食品中四大病原菌之一。1988年,WHO發(fā)表了“食源性李斯特菌病”勸告書,指導(dǎo)世界各國如何預(yù)防的污染和中毒,勸告各公共衛(wèi)生機(jī)構(gòu)加強(qiáng)監(jiān)測的力度,同時也將其列為食源性病菌重點(diǎn)檢測的對象之一。目前,雖然我國沒有發(fā)生大規(guī)模爆發(fā)流行,但卻有大量關(guān)于食品被單增李斯特菌污染的報(bào)告,這同樣引起了人們的關(guān)注。

 

如何有效分離和鑒定出單增李斯特菌,成為食品安全的重要問題。我國關(guān)于食品中李斯特菌的檢驗(yàn)根據(jù)我國食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)GB 4798.30-2010,包括增菌、分離和鑒定 3 個環(huán)節(jié)。目前,分離環(huán)節(jié)常會采用顯色培養(yǎng)基,使其菌落顏色不同于其它干擾菌,實(shí)現(xiàn)快速分離。

 

HiMedia公司(微生物培養(yǎng)基生產(chǎn)商)生產(chǎn)的單增李斯特菌顯色培養(yǎng)基(HiCrome標(biāo)識,貨號MV1540),該培養(yǎng)基是根據(jù)ottaviani 和 Agosti 開發(fā)的單核細(xì)胞增生李斯特氏菌鑒別基礎(chǔ)培養(yǎng)基,用于從食物和動物飼料中選擇性分離鑒別單核細(xì)胞增生李斯特氏菌,在這款李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基在該培養(yǎng)基配方上略作改良,它在制備時用無瘋牛病風(fēng)險(xiǎn)的植物蛋白胨取代了動物蛋白胨。

 

培養(yǎng)基中的HiVeg蛋白胨1號、HiVeg水解物、酵母粉和丙酮酸鈉提供了細(xì)菌生長所必需的營養(yǎng)和氮源物質(zhì)。葡萄糖是可發(fā)酵的碳水化合物。氯化鈉維持滲透壓平衡。磷酸鹽是緩沖液成分。氯化鋰和選擇性添加劑(FD212和FD213)抑制伴隨的菌群生長,而允許李斯特氏菌生長。李斯特氏菌水解顯色底物,產(chǎn)生綠色菌落。從其它李斯特氏菌中鑒別出單核細(xì)胞增生李斯特氏菌,是依據(jù)其*的磷脂酰肌醇特異性磷脂酶C(PIPLC)活性。磷脂酶C水解培養(yǎng)基中的底物添加劑(貨號FD214)導(dǎo)致單核細(xì)胞增生李斯特氏菌菌落周圍產(chǎn)生不透明的暈環(huán)。由于單核細(xì)胞增生李斯特氏菌和英諾克李斯特氏菌具有相似的生化特性,傳統(tǒng)培養(yǎng)基(PALCAM培養(yǎng)基)不能區(qū)分,使用該培養(yǎng)基可以有效區(qū)分開,且該培養(yǎng)基成分*符合我國國家標(biāo)準(zhǔn),HiMedia公司產(chǎn)品有認(rèn)證的GMP,CE和FDA,ISO9001,ISO13485等證書,品質(zhì),值得信賴。

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